荧光定量pcr 对所有样品上机检测
实时荧光定量PCR技术 ,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
检测方法:SYBRGreenⅠ法:在PCR反应体系中,加入过量SYBR荧光染料,SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后,发射荧光信号,而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号,从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步,SYBR定量PCR扩增荧光曲线图,PCR产物熔解曲线图。
TaqMan探针法:探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5’-3’外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物的形成完全同步。
服务流程:客户认真写好订单,提供待检基因相关信息、签订技术服务合同,支付预付款、设计合成定量PCR引物、DNA/RNA的抽提、定量、RNA反转录、PCR预实验,主要检测引物的特异性和扩增效率、正式定量实验、实验结果和数据分析,形成报告。
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